CAPS、HEPES、MOPS等Good’s缓冲剂的特性与应用
Good’s缓冲剂,又称两性离子缓冲剂,是一种广泛应用于生物研究、诊断医药和临床化学等领域的生物缓冲剂。常见的Good’s缓冲剂有CAPS、HEPES、MOPS、PIPES等。今天主要以HEPES、MOPS、CAPS为例,介绍一下Good’s缓冲剂所具有的特性及应用。
Good’s缓冲剂为氨基磺酸类有机化合物配成溶液,除pH值比较稳定外,还具有以下特性:
(1)在水溶液中有良好的溶解性,水溶液无色透明;
(2)在化学上稳定,对生物没有毒性且对生物膜无明显的渗透作用;
(3)酸碱解离常数(pKa值)稳定,一般在6-8,释放质子的能力稳定,且受离子浓度、溶液组成和温度的影响较小;
(4)不是生化反应系列的代谢物、激活剂或者抑制剂,也不是酶的底物,即与多种酶和化学试剂不发生反应,用于组织培养、病毒诊断等试验时,细胞表现出较高的生命力。
(5)在紫外波实际上无特征吸收,在波长小于230-240nm时才有微弱的吸收,因而不干扰通常的光度法测量。
(6)对阳离子无络合能力或者微弱的络合能力;
CAPS、HEPES、MOPS的应用
Good’s缓冲剂在组织培养、疫苗生产、阳离子功效的研究、细菌培养、组织的低温贮藏、病毒鉴定、血蛋白储藏、真菌原生质培养、电子显微术、以及生物物质的分离技术等方面得到广泛的应用。
CAPS全称3-环已氨基丙磺酸,CAS:1135-40-6,pH缓冲范围9.7~11.1。CAPS作为蛋白印迹转移缓冲液或转膜缓冲液,更适用于小分子量蛋白质转移到PVDF膜或硝酸纤维素膜;此外,还用作阳离子交换层析中的洗脱液、毛细管电泳中的运行缓冲液、酶测定缓冲液等。
HEPES全称4-羟乙基哌嗪乙磺酸,CAS:7365-45-9,pH缓冲范围是6.8-8.2。HEPES应用于针对各种类型有机体的细胞培养基、蛋白质研究,还可用于生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里,因具有对细胞无害性作用且能长时间控制恒定的pH范围等优点,常备用作化妆品添加剂,起到活性剂、脱皮剂、促透剂等作用。此外有研究报道,HEPES还作为一种有效的还原剂和稳定剂应用于过渡金属纳米颗粒的制备过程中。
MOPS全称3-吗啉丙磺酸,CAS:1132-61-2,pH缓冲范围是6.5-7.9。MOPS用于生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里;作为二维凝胶电泳中等电聚焦电泳(IEF)的电解质系统成分;还可应用于Northern杂交,作为RNA的分离和转膜时的缓冲液。
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